微生物研究技術——無菌操作技術
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活菌總數(shù);大腸菌群;大腸桿菌;腸道桿菌科;金黃色葡萄球菌;綠膿桿菌;沙門氏菌;李斯特菌;腸球菌;
亞硫酸鹽還原梭狀芽孢桿菌;產(chǎn)氣莢膜梭菌;霉菌(曲霉屬**、曲霉菌);酵母菌。
顯微鏡技術問世而使人類開始認識了微生物，然而在對微生物的生命活動和功能有所知曉之前，微生物學并沒有誕生。促使微生物學迅速誕生的，是無菌操作技術和純種培養(yǎng)技術。在1861年，偉大的微生物學家巴斯德做了一個有名的實驗。對于微生物學發(fā)展具有決定性的作用。
巴斯德用一個有長頸的圓底燒瓶裝上肉湯，如果就這么放著，幾天后肉湯便渾濁發(fā)臭了，用顯微鏡可以觀察到里面長了許多細菌。如果把長長的瓶頸用火焰燒成彎曲狀，雖然瓶口還是和外界相通，氧氣可以自由出入，可是肉湯放置很長時間也不會變渾濁。如果把里面的肉湯從彎曲處往瓶口傾折，讓液體接觸瓶口，再讓液體流回瓶中，幾天后，液體又變渾發(fā)臭了。巴斯德這個實驗充分說明，肉湯之所以變渾發(fā)臭，是肉湯里面的細菌繁殖造成的，如果加熱殺死了肉湯里面的細菌，又不讓外面的細菌進去，肉湯就不會有細菌生長。液體和瓶口接觸后，因為空氣中的塵埃和細菌沾在瓶口，通過肉湯進入瓶內，所以幾天后會變渾發(fā)臭。而且，燒瓶盡管有彎長的頸，可是瓶口是和外界相通的，空氣可以自由進入，所以可以保證里面有氧氣，所以不是沒有氧氣而使細菌不能生長。
直到20世紀６０年代，在倫敦的一個研究所中，還一直保存著19世紀后期為否定自然發(fā)生論所用的的一些陳年肉湯，它們在70年后依然清亮如故。巴斯德這個簡單但是具有說服力的有名實驗，證實了微生物只能從微生物產(chǎn)生而不能自然地從沒有生命的物質發(fā)生。從此，人們開始認識到無菌操作的重要。滅過菌的物質在適當保護下將保持無菌狀態(tài)，除非有人去感染它。巴斯德奠定了這個微生物學的基本原理。
-- 巴斯德否定自然發(fā)生論的實驗 --
**和**的方法：
我們知道了消除微生物對外科手術和食品保藏的重要性，也明白要研究某種微生物，實現(xiàn)必須保證沒有混雜由外界進入的不相干的其他微生物，就必須把培養(yǎng)微生物的環(huán)境徹底**。這是無菌操作的前提。100多年來，科學家們發(fā)明了各種**和**的方法。
在講述這些方法之前，我們要弄清**和**兩個不同的概念。所謂**，是指消除附著在器具或食品中的有害的（或者引起**，或者使食品腐爛）微生物。但**不一定能消滅全部微生物。例如李斯特用石炭酸處理外科手術器械并不能殺死全部微生物。因為有的微生物比較皮實，采用過激的手段殺死它們的同時容易把器具或食品破壞掉。不過這些皮實的微生物一般不會致病，在其他條件不具備時也不易生長，保留他們影響不大。如果我們的目的是研究某一種微生物，則必須保證在我們的器具中和培養(yǎng)它們的基質內沒有任何其他微生物混雜，這時就必須在放進要研究的某種特定微生物之前，把容器內的全部微生物殺死他們，這種處理方法就是**。
其實，在人類長期生活實踐中已經(jīng)采用過**和**的方法，不過在微生物學誕生前，人們只是知其然，不知其所以然罷了。例如在沒有冰箱之前，我們知道在夏天把剩菜剩飯重新加熱后**天就不會餿，再如把得重病死亡者的用具全部付之一炬。這就是**和**。